研究背景及目的
急性心肌梗死目前在心血管疾病中属于高发病率和高死亡率中的一员。早期再灌注治疗无论是溶栓或急诊经皮冠状动脉(冠脉)介入治疗是心肌挽救最实用和最广泛采用的方法。虽然这些治疗方法已被大大改善,患者的恢复仍然不尽人意,缺血再灌注损伤是影响患者康复的最重要因素之一。
近年来,研究发现细胞凋亡是急性心肌缺血再灌注损伤中的心肌细胞死亡的重要机制。此外炎症反应也是引起心肌缺血再灌注损伤的重要机制。西红花苷又称为西红花素、藏红花素,是天然界存在的唯一水溶性类胡萝卜素。是西红花中的活性成分,主要包括西红花苷-1、西红花苷-2、西红花苷-3、西红花苷-4和顺式西红花苷-1等,这类天然产物苷元相同,均为西红花酸(藏红花酸)。藏红花酸是藏红花提取物的主要活性成分之一,既往的相关研究已经证实其对脑、肺、肾、肝的缺血再灌注损伤有保护作用,其机制涉及抑制氧化应激、炎症反应、细胞凋亡等方面。本研究探讨藏红花酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎症反应和细胞凋亡的影响及其机制。实验材料动物:选择健康成年Wistar雄性大鼠30只,体重(±20)g,由山东大学实验动物中心提供,在本实验室适应性喂养3天后用于实验。药品与试剂:藏红花酸购自济南浩化实业有限责任公司,使用前以0.5%羧甲基纤维素钠(0.5%CMC-Na)制成0.5%的悬浮液。肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL-10)酶链免疫收附法(ELISA)试剂盒购自厦门慧嘉生物有限公司,脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)试剂盒购自南京凯基生物有限公司。
方法和结果
分组与给药方法:将健康成年Wistar雄性大鼠30只随机分为假手术组,缺血再灌注组,藏红花酸组,每组10只。按如下方案给药:假手术组:大鼠先灌服0.5%CMC-Na,10ml/(kg·d),7天后开胸,只穿线不结扎冠脉。缺血再灌注组:大鼠先灌服0.5%CMC-Na,10ml/(kg·d),7天后开胸结扎冠脉前降支45min,再灌注液体min,建立缺血再灌注损伤模型。藏红花酸组:造模前一周给予0.5%藏红花酸50mg/(kg·d)灌胃,余同缺血再灌注组。1、各组大鼠血清CK-MB、TNF-α和IL-10含量比较(±s,n=10)结果显示:藏红花酸对大鼠缺血再灌注后血清CK-MB、TNF-α与IL-10含量的影响:与假手术组相比,缺血再灌注组及藏红花酸组CK-MB和TNF-α含量均明显升高(P0.01),藏红花酸组IL-10含量也明显升高(P0.01);而与缺血再灌注组相比,藏红花酸组CK-MB和TNF-α含量明显降低,IL-10含量明显升高(P0.01)。结果显示:藏红花酸对缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响
UNEL染色结果显示,与假手术组相比,缺血再灌注组及藏红花酸组心肌细胞凋亡指数明显增加(P0.01);与缺血再灌注组相比,藏红花酸组凋亡指数明显降低(P0.01),差异均有统计学意义。讨论由于缺血性心脏病发病率和死亡率逐年增加,因此其